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利用酵母亚门酵母菌的多样性工程师的生物素依赖性生长酿酒酵母

来源:ASM2020-06-08

ASM 2020-06-08

生物素是羧化酶的重要辅助因子,对于所有生命王国都是必不可少的。由于天然生物素合成并不总是足以满足快速生长和产物形成的需要,因此研究和工业中的微生物培养通常需要补充生物素。酵母中从头生物素的生物合成尚不完全清楚,这阻碍了尝试在这些与工业相关的微生物中优化途径。根据酿酒酵母对生物素原生质的实验室进化的先前工作将Bio1(其催化功能尚未解决)确定为生物素合成的瓶颈。这项研究旨在消除啤酒酵母中的瓶颈实验室菌株CEN.PK113-7D。筛选了35种酵母菌酵母菌,发现有6种无需补充生物素即可快速生长的物种。从这些生物素原营养型之一,Cyberlindnera fabianii中分离出来的酿酒酵母 BIO1ScBIO1)直系同源基因的过表达使CEN.PK113-7D菌株在无生物素的培养基中快速生长。通过在其他实验室和工业酿酒酵母菌株中单表达C. fabianii BIO1CfBIO1)也获得了相似的结果。然而,生物素的原营养仅限于有氧条件,这可能反映了氧参与了假定的氧化还原酶Cf催化的反应生物1。在无生物素培养基上的需氧培养中,表达Cf Bio1的酿酒酵母菌株对生物素营养缺陷型酿酒酵母的污染敏感性降低。这项研究说明了如何利用巨大的酿酒酵母基因组资源来改善工业相关酿酒酵母的生理特性。

重要事项已报道的代谢工程学策略可在不存在生物素的情况下实现最佳生长,与酿酒酵母的大规模工业应用直接相关。生物素原养型的重要好处包括降低化学定义的工业生长培养基的制备过程中的成本,以及降低生物素原养型菌株对营养缺陷型微生物污染的敏感性。观察到的工程菌对生物素合成的氧依赖性与进一步研究真菌生物素生物合成途径有关。

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